簡要描述:
肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)測試盒是存在于線粒體內膜的一類酰基轉移酶。可逆地催化從酰基輔酶將酰基轉移至L-肉毒堿的反應,在轉運脂肪酸通過線粒體內膜的過程中起重要作用。
更新時間:2024-09-02;廠商性質:經銷商;覽量:1145
商品詳情:
肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)測試盒正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
肉毒堿棕櫚酰轉移酶是存在于線粒體內膜的一類酰基轉移酶。可逆地催化從酰基輔酶將酰基轉移至L-肉毒堿的反應,在轉運脂肪酸通過線粒體內膜的過程中起重要作用。
貨號 | 規格 | 檢測方法 |
YSH3387 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3387-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
測定原理:
基于肉堿和脂酰輔酶在丙二酰輔酶存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉移酶(CPT-I)的作用,產生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔酶(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應后,產生黃色的TNB。通過其吸收峰值得變化(412nm),來定量分析CPT-1的活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水
樣品中AA提取:
1.按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬。
注意事項:
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內使用完畢。
2. 為保證實驗結果的準確性,需先取1-2個樣做預實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
信號素3GELISA試劑盒 SEMA3G免費代測試劑
信號素3FELISA試劑盒 SEMA3F免費代測試劑
信號素3DELISA試劑盒 SEMA3D免費代測試劑
信號素3BELISA試劑盒 SEMA3B免費代測試劑
信號淋巴細胞激活分子家族成員7ELISA試劑盒 SLAMF7免費代測試劑
信號傳導轉錄激活因子5BELISA試劑盒 STAT5B免費代測試劑
信號傳導轉錄激活因子5AELISA試劑盒 STAT5A免費代測試劑
信號傳導轉錄激活因子2ELISA試劑盒 STAT2免費代測試劑
信號傳導轉錄激活因子1ELISA試劑盒 STAT1免費代測試劑
鋅指同源框蛋白4ELISA試劑盒 ZFHX4免費代測試劑
心臟肌球蛋白結合蛋白CELISA試劑盒 MYBPC3免費代測試劑
心磷脂酰基轉移酶1ELISA試劑盒 LCLAT1免費代測試劑
心磷脂合酶ELISA試劑盒 CLS免費代測試劑
心肌型蘭尼定受體2ELISA試劑盒 RYR2免費代測試劑
心肌素ELISA試劑盒 MYOCD免費代測試劑
肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)測試盒淀粉比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
直鏈淀粉比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
直鏈淀粉比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
支鏈淀粉比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
支鏈淀粉比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
α比色法檢測試劑盒 微量法 100管/48樣
α比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
β比色法檢測試劑盒 微量法 100管/48樣
β比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣